流式細胞儀標本的製備

流式細胞儀(yi) 標本的製備流式細胞儀(yi) （FCM）是八十年代集單克隆抗體(ti) 、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀(yi) 器，已廣泛應用於(yu) 免疫學、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方麵的研究和臨(lin) 床常規工作。其中檢測人白細胞表麵標誌可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷，對淋巴細胞群和亞(ya) 群進行分類，還能分離純化某一群或亞(ya) 群細胞。活細胞免疫熒光技術是用於(yu) FCM檢測的標本準備，染色後也能在熒光顯微鏡下進行觀察，在某些實驗條件下，活細胞免疫熒光染色後的特異性和敏感性要優(you) 於(yu) 滴片固定的常規間接免...

ELISA原理，以及操作步聚

ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之後發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來，發展十分迅速，目前已被廣泛用於(yu) 生物學和醫學科學的許多領域。（一）原理ELISA是以免疫學反應為(wei) 基礎，將抗原、抗體(ti) 的特異性反應與(yu) 酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由於(yu) 抗原、抗體(ti) 的反應在一種固相載體(ti) ──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育後，可通過洗滌除...

標本的收集與保存注意事項

臨(lin) 床檢驗常見的標本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些標本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。一、血液標本有些生理因素，如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體(ti) 位等均可影響血液中某些成分的變化，有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素幹擾，以條件一致為(wei) 宜，如無法避免，應在標本上注明該因素。1．外周血一般選取左手無名指內(nei) 側(ce) 采血，該部位應無凍瘡，炎症，水腫，破損。如該部位不符合要求，以其他手指部位代替。對燒傷(shang) ...

Western Blot 原理和操作方法

WesternBlot工作原理蛋白質的電泳分離是重要的生物化學分離純化技術之一,電泳是指帶電粒子在電場作用下,向著與(yu) 其電荷相反的電極移動的現象.根據所采用的支持物不同,有瓊脂糖凝膠電泳,澱粉凝膠電泳,聚丙烯酰胺凝膠電泳等.其中,聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）由於(yu) 無電滲作用,樣品用量少（1-100μg）,分辨率高,可檢出10-9-10-12mol的樣品,凝膠機械強度大,重複性好以及可以通過調節單體(ti) 濃度或單體(ti) 與(yu) 交聯劑的比例而得到孔徑不同的凝膠等優(you) 點而受到廣泛的應用.SDS-PAG...

熒光探針Fluo-3/AM和FuraRed測量單細胞中比率鈣

熒光探針Fluo-3/AM和FuraRed測量單細胞中比率鈣中國醫學物理學雜誌1999年第3期第16卷實驗研究作者：馬曉冬朱曉亮趙清張瑾張颯雷國華黃行許鮑永耀單位：馬曉冬趙清張瑾張颯雷國華黃行許鮑永耀（*軍(jun) 醫大學中心實驗室）；朱曉亮（南方醫院皮膚科,廣東(dong) 廣州510515）關(guan) 鍵詞：激光掃描共聚焦顯微鏡；Fluo-3/AM；FuraRed；比率鈣...摘要：應用ACAS570激光掃描共聚焦顯微鏡（laserscanningconfocalmicroscope，LSCM簡稱共焦顯微...

激光掃描共焦顯微鏡原理及其應,細胞上的定位很漂亮

激光掃描共焦顯微鏡（LSCM）是八十年代問世的一種新型分析儀(yi) 器，由於(yu) 其高分辨率，高靈敏度，高放大率等特點，在細胞水平上能作多種功能測量和分析，成為(wei) 分析細胞學的重要研究工具，激光掃描共焦顯微鏡是在顯微鏡基礎上配置激光光源，掃描裝置，共軛聚焦裝置和檢測係統而形成的新型顯微鏡。它對活細胞分層掃描後得到光學切片，可進行細胞三維重建。測量分析細胞形態學參數和熒光強度。利用熒光探針標記LSCM可以對細胞內(nei) 微細結構和離子的動態變化進行定性、定量、定時和定位分析。LSCM可以進行顯微手術，細...

流式細胞儀測定血小板胞漿遊離鈣濃度

流式細胞儀(yi) 測定血小板胞漿遊離鈣濃度莊明明，溫奕欣，劉少列，洪曉鵬西安交通大學學報2005年10月第26卷第5期摘要：目的建立流式細胞儀(yi) 測定血小板胞漿遊離鈣離子濃度\[Ca2+\]i的方法。方法用Fluo3AM作為(wei) 鈣指示劑，在有或無細胞外鈣\[Ca2+\]o存在的條件下，測定靜息和凝血酶激活狀態下人血小板胞漿遊離鈣離子濃度\[Ca2+\]i的變化。結果Fluo3AM標記的血小板的平均熒光強度明顯增加。凝血酶使負載Fluo3AM標記的血小板胞漿\[Ca2+\]i明顯增加，且...

如何選用特殊細胞係培養基？

培養(yang) 某一類型細胞沒有固定的培養(yang) 條件。在MEM中培養(yang) 的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，MEM做粘附細胞培養(yang) "細胞培養(yang) 、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yang) "細胞培養(yang) 是一個(ge) 好的開始，各種目的無血清培養(yang) AIMV（12005）培養(yang) 基（SFM）。L-穀氨酰胺在細胞培養(yang) 中重要嗎？它在溶液中不穩定嗎？L-穀氨酰胺在細胞培養(yang) 時是重要的。脫掉氨基後，L-穀氨酰胺可作為(wei) 培養(yang) 細胞的能量來源、參與(yu) 蛋白質的合成和核酸代謝。L-穀氨酰胺在溶液中經過一段時間後會(hui) 降解，但是確切的降解率一...